革命尚未成功,同志仍需努力

上周开题老板没在，昨天科会后专门听了我的开题报告，基本上没有对课题设计给出太多意见和建议，不过还是催促快点发文章。

1． 4*和5*的风险似乎没有太多的结果，总让人觉得悬悬的，师兄也建议放放了，主要是PAGE的结果不确定，PCR的条件似乎也不稳定，测序杂合也不好说。我应该自己抽空再优化一下条件；

2． 现在的全长细胞单克隆是最烦人了，而且始终鉴定不出来，这个最头疼！western 是赶紧得出结果的东西，不然细胞总鉴定不了，这么养着也不是个办法；

3． 和孙立军同时合作的cyclin 家族的RT-PCR希望合作愉快，除了RT-PCR之后也是要做Western的，才能获得指标；

4． 主任指示的将构建的载体做原核表达做单抗的工作，也要尽快完成，原核表达的那一套东西早上刚看过资料，基本上应该跟真核表达差不多吧，不过很久没有做分子克隆的东西了，现在连瓶皿之类都要重新准备，更别说感受态细胞等，不过做起来如果顺利的话也很快；

5． 剩余的缺失突变体应该将5*的一套转染细胞，这样又是一个月的时间，提质粒、筛选，这个主要是在前期组化表达的基础上，加一些指标，跟我的4*、5*全长一起，从比较确定的apoptosis上得到指标，发文章，当然此后的工作会更多。

6． 如此说来，我现在的事情好多哦，分子克隆的、养细胞、转细胞、western、RT-PCR，我应该好好利用与安排好时间，让自己充实起来，充分利用好时间，其他的事情也不用没事找事了。